1.一體化小室——細(xì)胞培養(yǎng)&顯微成像兩用玻片/培養(yǎng)皿
細(xì)胞免疫熒光實(shí)驗(yàn)?zāi)窃趺醋龅模?/span>
還在用小玻片，先泡酸、再晾干、再coating、再種細(xì)胞、染色、最后封片成像？
那您太out了吧！
使用德國(guó)ibidi產(chǎn)品，先養(yǎng)細(xì)胞、然后直接固定、染色、成像，在培養(yǎng)皿/玻片上全部搞定！不僅能幫您把細(xì)胞養(yǎng)好、還能幫您省時(shí)省力的獲得漂亮的成像結(jié)果（見(jiàn)圖1）！
圖1. 傳統(tǒng)爬片方法（左）與ibidi 產(chǎn)品免疫熒光實(shí)驗(yàn)（右）的比較
2.ibidi產(chǎn)品底部媲美蓋玻片厚度，為高分辨率顯微成像而設(shè)計(jì)的光學(xué)特性
德國(guó)ibidi公司研發(fā)的μ-Slide與μ-Dish系列產(chǎn)品，與一般市面上常見(jiàn)的細(xì)胞培養(yǎng)皿不同，其底部是由polymer塑料制成，具有與玻璃材質(zhì)媲美的高光學(xué)穿透與低背景熒光等特性。相較于一般細(xì)胞培養(yǎng)產(chǎn)品（圖2左），ibidi產(chǎn)品（圖2右）底部構(gòu)造厚度符合標(biāo)準(zhǔn)蓋玻片厚度（180 μm），用高倍鏡物鏡觀察，可以使焦距集中在待測(cè)樣本上，產(chǎn)生良好的成像結(jié)果。
圖2. ibidi細(xì)胞培養(yǎng)產(chǎn)品底部媲美蓋玻片厚度
3.ibidi產(chǎn)品底部化學(xué)耐受性強(qiáng)，適用于多種常用的細(xì)胞固定劑（見(jiàn)圖3）
圖3.ibidi產(chǎn)品底部適用的溶劑列表
4. 多種多樣的細(xì)胞培養(yǎng)表面
細(xì)胞進(jìn)行生長(zhǎng)、發(fā)育和信號(hào)傳遞很大程度上取決于細(xì)胞容器的表面處理方式。
ibidi 產(chǎn)品底部相比于普通培養(yǎng)皿更加平滑（見(jiàn)圖4）。目前，ibidi產(chǎn)品μ-Slides和μ-Dishes有標(biāo)準(zhǔn)底、玻璃底以及多種底部預(yù)包被的產(chǎn)品，適用于培養(yǎng)不同的細(xì)胞類型，不同底之間的比較（見(jiàn)圖5）。
ibidi標(biāo)準(zhǔn)底具有親水超薄的特性，該底部的光學(xué)特性符合多種成像技術(shù)的要求，如相差、共聚焦和雙光子顯微成像。
ibiTreat，作為ibidi的表面處理方式，通過(guò)了大量不同細(xì)胞系和原代細(xì)胞培養(yǎng)測(cè)試，且已發(fā)表的30000多篇使用了ibidi產(chǎn)品的期刊論文中，超過(guò)90%使用了ibiTreat，表明大多數(shù)細(xì)胞在ibiTreat下生長(zhǎng)良好，無(wú)需進(jìn)行額外的表面處理。ibiTreat是一種物理修飾的表面處理方式，讓耗材表面親水，利于絕大多數(shù)種類的細(xì)胞貼壁，可與其他標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞培養(yǎng)瓶和培養(yǎng)皿相媲美。
圖4. AFM（原子力顯微技術(shù)）測(cè)量表面粗糙度。ibidi產(chǎn)品（右下）比普通培養(yǎng)皿具有更平滑的底部構(gòu)造，更加的成像效果。
ibidi標(biāo)準(zhǔn)底也有疏水、無(wú)包被的表面可以選擇。可以根據(jù)具體的實(shí)驗(yàn)需求，進(jìn)行特定的包被，或者直接用來(lái)培養(yǎng)非貼壁細(xì)胞。
ibidi也有玻璃底的產(chǎn)品。玻璃底可以直接培養(yǎng)細(xì)胞，但可能需要進(jìn)行表面處理來(lái)促進(jìn)細(xì)胞更好的貼壁。ibidi研發(fā)的玻璃底產(chǎn)品尤其適用于TIRF、單光子及單分子應(yīng)用。
圖5. ibidi標(biāo)準(zhǔn)底與ibidi玻璃底
基于以上特殊的底部構(gòu)造，ibidi μ-Dish，μ-Slide以及μ-plate等產(chǎn)品都既適用于常規(guī)細(xì)胞培養(yǎng)，又可以簡(jiǎn)化免疫熒光實(shí)驗(yàn)步驟、節(jié)約實(shí)驗(yàn)時(shí)間，并且獲得顯微成像效果。
ibidi μ-Dishes產(chǎn)品可以進(jìn)行常規(guī)的細(xì)胞培養(yǎng)、轉(zhuǎn)染、免疫熒光實(shí)驗(yàn)以及高分辨率顯微成像。目前ibidi μ-Dishes主要包括35mm（高壁和低壁）（見(jiàn)圖6）。35mm低壁的產(chǎn)品更適合于在顯微鏡下對(duì)細(xì)胞進(jìn)行操作，如進(jìn)行電生理膜片鉗記錄細(xì)胞，或者吸取單細(xì)胞進(jìn)行單細(xì)胞基因組測(cè)序等實(shí)驗(yàn)。
圖6. ibidi μ-Dish系列產(chǎn)品：35mm高壁VS低壁
ibidi μ-Dishes另外一個(gè)精巧的設(shè)計(jì)是帶鎖的蓋子（見(jiàn)圖7）。當(dāng)蓋子處于lock位置，減小蒸發(fā)的影響，因而可以在非濕潤(rùn)環(huán)境中進(jìn)行長(zhǎng)時(shí)程的細(xì)胞實(shí)驗(yàn)，如需要在培養(yǎng)箱外，顯微鏡下進(jìn)行長(zhǎng)時(shí)程的活細(xì)胞觀察實(shí)驗(yàn)。由于Dish特殊的氣體通透特性，在細(xì)胞培養(yǎng)期間氣體交換（C02，O2）是并不受lock位置影響的。
圖7.帶鎖的培養(yǎng)皿設(shè)計(jì)
μ-Slides well系列產(chǎn)品：μ-Slides 2 well，4 well，8well
如果您希望同時(shí)獲得多個(gè)樣品的顯微成像結(jié)果，如比較同種細(xì)胞加入不同藥物刺激的形態(tài)變化，或者實(shí)驗(yàn)初期用來(lái)篩選好用的抗體及摸索最佳抗體濃度等實(shí)驗(yàn)，推薦使用μ-Slides well系列產(chǎn)品（見(jiàn)圖8）。不同大小的開(kāi)放小室適用于不同量的細(xì)胞培養(yǎng)。其底部也是ibidi標(biāo)準(zhǔn)底處理，滿足細(xì)胞培養(yǎng)、免疫熒光實(shí)驗(yàn)、高分辨率顯微成像的需求。
圖8. μ-Slides well系列產(chǎn)品：μ-Slides 2 well，4 well，8well，18well
在此基礎(chǔ)上，如果需要進(jìn)行更佳的顯微鏡成像實(shí)驗(yàn)，如進(jìn)行實(shí)時(shí)的活細(xì)胞不同位點(diǎn)的掃描，μ-Slides well ph+系列產(chǎn)品更適合您。在傳統(tǒng)的μ-Slides well的孔的中間，ph+產(chǎn)品加了一層特殊的平板（見(jiàn)圖9），這層平板可以有效避免開(kāi)放小室中影響相差成像效果的凹液面的形成。在這層平板與well的四周有縫隙，方便向其中加入細(xì)胞及換液等操作。
圖9. μ-Slides well 與 μ-Slides well ph+ 產(chǎn)品以及成像對(duì)比圖。左圖. 產(chǎn)品對(duì)比圖，ph+在中間有特殊的平板，四周有孔洞，方便鋪細(xì)胞及換液等操作。右圖. ph+有效防止凹液面形成（右側(cè)），整個(gè)視野都有良好的相差成像效果。
以上產(chǎn)品還有底部帶網(wǎng)格的（見(jiàn)圖10），如35 mm Dish Grid-500 & Grid-50，μ-Slides 8 well Grid-500。可應(yīng)用于細(xì)胞及細(xì)胞團(tuán)的重定位，特定區(qū)域發(fā)生事件的數(shù)目如細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率的統(tǒng)計(jì)，細(xì)胞運(yùn)動(dòng)距離的參考，對(duì)單個(gè)細(xì)胞進(jìn)行顯微注射或者追蹤軸突的生長(zhǎng)等。同樣這些產(chǎn)品具備ibidi標(biāo)準(zhǔn)底設(shè)計(jì)，適用于高分辨率的顯微成像。
圖10. 帶網(wǎng)格產(chǎn)品的底部網(wǎng)格圖示
一體化小室產(chǎn)品還包括μ-Slide channel 系列產(chǎn)品（圖11A），這類產(chǎn)品有通道式的細(xì)胞培養(yǎng)空間，同樣具有ibidi標(biāo)準(zhǔn)底，適合于高分辨率顯微成像。產(chǎn)品兩端有魯爾接頭，可應(yīng)用于流體剪切力實(shí)驗(yàn)，即在培養(yǎng)基流動(dòng)狀態(tài)下就行細(xì)胞培養(yǎng)。
在開(kāi)放小室中鋪細(xì)胞時(shí)，通常依賴于人為晃動(dòng)操作，對(duì)于新手尤其容易使細(xì)胞聚團(tuán)，導(dǎo)致細(xì)胞分布不均（圖11C）。而通道式的設(shè)計(jì)，巧妙回避這一問(wèn)題，只需要向通道中加入細(xì)胞懸液，無(wú)需晃動(dòng)（圖11B），輕松使細(xì)胞在通道中均勻分布（圖11D）。另外當(dāng)需要進(jìn)行精確的少量試劑換液時(shí)，或者試劑、抗體珍貴，μ-Slide channel 系列產(chǎn)品將是好的選擇。
圖11. μ-Slide channel 系列產(chǎn)品。A. μ-Slide I及μ-Slide IV產(chǎn)品圖示。B. μ-Slide I為例說(shuō)明系列產(chǎn)品適用步驟，向通道中加入100 ul細(xì)胞懸液，向一側(cè)儲(chǔ)液池中加入無(wú)細(xì)胞的培養(yǎng)液，向另一側(cè)儲(chǔ)液池中加入無(wú)細(xì)胞的培養(yǎng)液，置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。C. 開(kāi)放小室的細(xì)胞分布，依賴于晃動(dòng)操作，經(jīng)常會(huì)分布不均勻。D. channel中細(xì)胞的分布，由于其集合設(shè)計(jì)，使細(xì)胞非常容易的均勻分布在通道中。
考慮到有些用戶希望保存標(biāo)本，ibidi公司還開(kāi)發(fā)了removable的硅膠培養(yǎng)室（圖12左），用于細(xì)胞培養(yǎng)和顯微成像。將硅膠材料移除后，可以封片進(jìn)行保存。
另外，ibidi公司還開(kāi)發(fā)了Sticky的well及通道（圖12右）。這類產(chǎn)品通用性強(qiáng)，可與多種多樣的底部材料粘貼。而且對(duì)于不易放入通道培養(yǎng)的細(xì)胞、組織等，可以選擇先放在底部材料上，再將培養(yǎng)通道粘貼到其上進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。
圖12. Removable & Sticky系列產(chǎn)品。圖左. 3/8/12 Well Chamber, removable；圖右. sticky-Slide 8 well、sticky-Slide I Luer、sticky-Slide VI 0.4。
易必迪ibidi公司專注于細(xì)胞培養(yǎng)及功能實(shí)驗(yàn)的耗材及儀器開(kāi)發(fā)，產(chǎn)品設(shè)計(jì)巧妙，適用于各種各樣的實(shí)驗(yàn)需求，簡(jiǎn)化實(shí)驗(yàn)步驟，節(jié)約實(shí)驗(yàn)時(shí)間。如果您也在培養(yǎng)細(xì)胞，也在做細(xì)胞免疫熒光實(shí)驗(yàn)，也在做細(xì)胞功能實(shí)驗(yàn)，那么快來(lái)試試ibidi系列產(chǎn)品吧，絕對(duì)讓您實(shí)驗(yàn)變得輕松簡(jiǎn)單，事半功倍！
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