高通量組織研磨儀對多酚含量高的植物(木本植物)的細胞破壁
實驗?zāi)康?/span>
研磨破碎多酚含量高的植物(木本植物),后續(xù)可提取其核酸或蛋白。
實驗原理
充分磨碎研磨破碎多酚含量高的植物,再用相關(guān)試劑提取其總RNA。
實驗材料和器具
樣品:銀杏葉子
儀器:高通量組織研磨儀(上海凈信,Tissuelyser-24)
耗材:離心管(上海凈信,0.4研磨單位),研磨珠(上海凈信,5號,1顆)
實驗步驟
1.取0.2研磨單位的樣品放入0.4體積epp管中
2.加入1-2粒5號研磨珠
3.加入0.2體積l的CTAB 抽提液
4.將加有樣品的epp管放入上海凈信的高通量組織研磨儀的適配器中,蓋好
5.將研磨頻率調(diào)到12單位振頻,設(shè)定研磨時間為90秒(可根椐樣品的研磨的難易程度來調(diào)節(jié),此數(shù)據(jù)是以銀杏葉子為樣本得出)
6.啟動研磨儀對樣品進行研磨(根據(jù)不同的樣品,本身性質(zhì)不同,需要對研磨頻率和研磨時間進行適當?shù)恼{(diào)整)
實驗注意事項
如果需要提取的樣品比較多(比如1g),研磨好的樣品在后續(xù)的提取中,需要轉(zhuǎn)移到大的epp管中,研磨時可以加入較少的抽提液,研磨完畢按照1g樣品2體積提取液補充抽提液,進行后續(xù)的操作。